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Martes, 17/9/2019

VacciMonitor
Biotecnología Aplicada


Resumen
Para evaluar la viabilidad y la capacidad de colonizacion de una fomlulacion vacunalliofilizada de la cepa 638 de V~ clwleroe, El Tor Ogawa [ctx:F, celA+J derivada originalmente de la cepa C7258, se obtuvieron a escala de laboratorio dos lotes (00 y 01) y un sublote del 00 que se conservo a 45 0(: durante 7 d .El producto obtenido rue resuspendido en disolucion reguladora de fosfato (DRF) o en disolucion de hidrogenocarbonato de sodio (1,3 %). Tambien rueron preparadas suspensiones de la cepa 638 a partir de cultivos frescos de placas de agar triptona soya sin glucosa como controles positivos. La viabilidad se evaluo por determinacion de unidarles fomladoras de colonia (UFC)/mL, por el metodo de diluciones y siembra en superficie a los 0, 10, 20,40 y 60 min despues de resuspendido. La capacidad de colonizacion se evaluo inmediatamente despues de resuspendido el producto, empleando el modelo de ratones neonatos con inoculacion oral de 50 I-lL con una carga bacteriana de 1Q5U FC por rawn. Se emplearon 10 ratones por ensayo y se determinola colonizacion a partir de homogeneizados de intestino, los cuales rueron diluidos de fomla seriada (1:10) y cultivados sobre la superficie de placas de ABTCS para el conteo de colonias. Todas las deternlinaciones se realizaron por triplicado para carla tiempo o condicion. Para la comparacion estadistica de los resultados, se aplic6ANOVAy Prueba "t". Los resultados demostraron que no hubo diferencias en la viabilidad ni en la colonizacion de las variantes resuspendidas, tanto en DRF como en disolucion de hidrogenocarbonato de sodio; ni entre los tiempos estudiados. La conservacion a 45 '{:: por 7 d afect6 significativamente la viabilidad, pero las viables mantlivieron la capacidad de colonizacion. Tampoco hubo diferencias significativas con los valores de colonizacion obtenidos al preparar los in6culos con cultivos frescos. Estos resultados permiten seftalar que los preparados evaluados, al ser resuspendidos en disoluci6n de hidr6genocarbonato de sodio presentan un comportamiento satisfactorio, seglm los criterios de viabilidad y de colonizaci6n en el modelo de ratones neonatos.
 

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