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Domingo, 21/7/2019

VacciMonitor
Biotecnología Aplicada


Resumen
Hasta el momento Cuba no contaba con un sistema confirmatorio de la infección por el virus de la hepatitis C (VHC) en aquellas personas seropositivas a la prueba de anticuerpos, ni podía detectar la infección en el período de ventana que media entre la infección y la seroconversión; por otro lado la adquisición de estos sistemas diagnósticos en el mercado internacional es limitada por ser excesivamente costosos. El objetivo de este trabajo fue desarrollar un sistema diagnóstico por Biología Molecular, con reactivos y tecnología propia adaptado al SUMA, al menor costo posible y factible de insertar en nuestro sistema de salud. Como resultado se desarrolló un sistema que denominamos: UMELOSA#63194; HCV CUALITATIVO, el cual consta de tres etapas: 1. Extracción del ARN del suero o plasma humano: Optimización del método del fenol-cloroformo modificado reduciendo los volúmenes de muestras y reactivos a la mitad y tiempo de reacción de 18 a 3 horas con muy buena sensibilidad. 2. Amplificación en dos pasos: Transcripción Inversa(RT)-Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) y PCR anidada. Optimización de volúmenes de enzimas, temperaturas y ciclos de ensayo. 3. Hibridación en fase sólida: Emplea menos de 10 #956;L del producto amplificado y una sonda no reportada anteriormente en la literatura. El ensayo es un sistema robusto, con una especificidad de 100%, sensibilidad de 101,7 UI/mL, así como concordancia de 100% contra el sistema comercial Amplicor HCV Test. Además es el primer ensayo de diagnóstico molecular desarrollado y registrado en nuestro país, lo cual sirve de base para nuevos ensayos con esta metodología.
 

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