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Martes, 17/9/2019

VacciMonitor
Biotecnología Aplicada


Resumen
En la actualidad existen dos variantes principales de vacunas orales contra el cólera: una basada en células inactivadas de diferentes
biotipos y serotipos y otra basada en la administración de cepas vivas genéticamente atenuadas. Una vacuna por subunidades pudiera
ser una variante muy atractiva. Este trabajo describe la purificación parcial y caracterización preliminar de extractos de proteínas de
membrana externa-lipopolisacárido (PME-LPS), obtenidos a partir de
proteoliposoma que posteriormente será estructurado en forma de cocleatos para su uso por vía oral en humanos. Las preparaciones
fueron obtenidas a través del uso de diferentes detergentes. La cantidad de LPS en cada preparación fue estimada mediante la
determinación de las unidades endotóxicas en el ensayo del
Vibrio cholerae O1, con el interés de seleccionar unLimulus (LAL). La composición de cada muestra fue evaluada mediante
SDS-PAGE
preparaciones, y la respuesta inmune fue determinada por ELISA y el título de anticuerpos vibriocidas. El tamaño molecular de la
preparación con mejores resultados en inmunogenicidad se estimó mediante la cromatografía en Sephacryl S-1000. Se obtuvieron
diferentes perfiles electroforéticos de acuerdo con el tipo de detergente utilizado. El LPS fue identificado en todas las preparaciones y
aquella obtenida con el SDS al 15% mostró la más baja relación proteínas/LPS y los mejores resultados en los ensayos de
inmunogenicidad. Adicionalmente se comprobó que su tamaño molecular es similar al observado en el proteoliposoma de VAMENGOC-
BC
de anticuerpos IgG anti-LPS y altos títulos de anticuerpos vibriocidas, luego de su administración por vía intranasal en ratones. Estos
resultados constituyen un importante paso en las investigaciones dirigidas a la obtención de una vacuna por subunidades, como
alternativa preventiva contra el cólera.
y Dot Blot. La inoculación intranasal (IN) en ratones Balb/c se utilizó para la evaluación de la inmunogenicidad de las. La preparación obtenida con el SDS al 15% constituye un proteoliposoma, con capacidad para estimular altos niveles
 

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